cDNA array를 이용한 파골세포 분화 관련 유전자의 탐색
IDENTIFICATION OF GENES INVOLVED IN OSTEOCLAST DIFFERENTIATION BY CDNA ARRAY ANALYSES
조영준, 이장희, 박슬희, 임상수,
소속 상세정보
조영준 ( ) - 조선대학교 치과대학 소아치과학교실
이장희 ( ) - 조선대학교 치과대학 소아치과학교실
박슬희 ( ) - 조선대학교 치과대학 소아치과학교실
임상수 ( ) - 조선대학교 치과대학 소아치과학교실
KMID : 0358920020290020278
Abstract
RAW 264.7과 이것이 분화한 파골세포양 세포에서 파골세포 분화관련유전자의 전체적인 유전자 발현을 조사하기 위해 cDNA array 방법을 사용하였다. 1176 cDNA spot grid가 있는 Mouse Atlas cDNA array 결과를 확인하기 위하여 역전사 효소 중합반응 검사를 시행하였다. cDNA array 결과 6개의 유전자가 2.5% 이상 발현이 증가하였으며(PKC betaⅡ, POMC, PTEN 등), 16개의 유전자가 2.5%이상 발현이 감소하였다(Osteopontin, Cyclin D1, Cathepsin C, PTMA 등), PKC betaⅡ유전자의 역전사-효소 중합 반응 검사 결과 이 유전자를 확인할 수 있었다. 파골세포 분화 결과 RAW 264.7 세포주에 비해 파골세포양 세포에서 PKC betaⅡ 유전자의 발현이 많았다. 파골세포 분화 관련 유전자는 RAW 264.7 세포주와 이것이 분화된 파골세포양 세포와 차이를 보였고, 이 유전자의 발현증가와 RAW 264.7 세포주의 파골세포 분화와 연관을 보였다.
To examine the global gene expression of osteoclastogenesis-related genes in RAW 264.7 and its differentiated OCLs through the use of Atlas Mouse cDNA Array 2.1 membranes printed with 1176 well-characterized mouse genes involved in biology. Both samples were screened in parallel using cDNA expression arrays. The array results were additionally validated using RT-PCR. The results of cDNA arrays showed that 6 genes were up-regulated >2.5-fold (PKC beta 1l. POMC, PEN, etc) and 16 genes were down-regulated )2.5-fold (Osteopontin, Cvclin Cathepsin C, PTMA, etc) in both samples at the mRNA level. RT-PCR analysis of PKC beta II of these differentially expressed genes gave result consistent with cDNA array findings. The result of osteoclastogenesis showed that the PKC beta II gene was overexpressed in OCLs compared with RAW264.7 cell line. Osteoclastogenesis-related genes are differentially expressed in RAW264.7 cell line and its differentiated OCLs. its gene overexpression correlates with osteoclast differentiation in RAW264.7 cell line.
키워드
파골세포 분화관련 유전자;cDNA array;Genes involved in osteoclast differentiation; cDNA array
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